高效液相色譜是色譜法的一個重要分支，以液體為流動相，采用高壓輸液系統(tǒng)，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內(nèi)各成分被分離后，進(jìn)入檢測器進(jìn)行檢測，從而實(shí)現(xiàn)對試樣的分析。該方法已成為化學(xué)、醫(yī)學(xué)、工業(yè)、農(nóng)學(xué)、商檢和法檢等學(xué)科領(lǐng)域中重要的分離分析技術(shù)應(yīng)用。

 

高效液相色譜法的應(yīng)用范圍十分廣泛，對樣品的適用性廣，不受分析對象揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制，幾乎所有的化合物包括高沸點(diǎn)、極性、離子型化合物和大分子物質(zhì)均可用高效液相色譜法分析測定，因而彌補(bǔ)了氣相色譜法的不足。

 

高效液相色譜儀各組件的作用介紹：

 

1.脫氣機(jī)：用于去除溶劑中的氣體和氣泡的裝置，確保流動相中的溶劑在進(jìn)入色譜柱之前不含氣體和氣泡，以保證分離和分析的準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性。

 

2.高壓泵：一臺高效液相色譜儀的好壞離不開泵的質(zhì)量，HPLC使用高壓泵將流動相推送通過柱子，以保持流動。當(dāng)需要對組分復(fù)雜的樣品進(jìn)行分離檢測時，這時一般會采用梯度洗脫法，以縮短分析周期，提高分離能力等。

 

3.進(jìn)樣器：在HPLC系統(tǒng)中起到樣品引入、體積控制、自動化和保護(hù)柱等作用，對實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確的樣品進(jìn)樣和高效的分離分析起關(guān)鍵作用

 

4.色譜柱：是實(shí)現(xiàn)樣品分離的核心組件，根據(jù)化合物與固定相之間的相互作用，在流動相的推動下將樣品中的化合物分離開來。

 

5.檢測器：在柱子出口處，分離的化合物通過檢測器進(jìn)行檢測和定量。常見的檢測器包括紫外-可見光譜、熒光、示差折光等檢測器